以下是紫外可見分光光度計的標(biāo)準(zhǔn)調(diào)試流程,涵蓋關(guān)鍵步驟及技術(shù)要點,旨在確保儀器處于最佳工作狀態(tài)并保障測量準(zhǔn)確性:
一、開機預(yù)熱與初始化
通電預(yù)熱:接通電源后開啟主機,預(yù)熱至少30分鐘,使氘燈/鎢燈達到熱平衡,電子系統(tǒng)穩(wěn)定。
自檢程序:啟動配套軟件,執(zhí)行儀器自檢功能,確認光源、單色器、檢測器及驅(qū)動電機工作正常。若提示故障代碼,需針對性排查(如更換損壞燈泡或修復(fù)電路連接)。
環(huán)境控制:調(diào)節(jié)實驗室溫度至25±2℃,濕度≤60%,避免冷凝水影響光學(xué)元件性能。
二、波長校準(zhǔn)
方法一:標(biāo)準(zhǔn)濾光片法
選用認證濾光片:插入已知特征吸收峰的標(biāo)準(zhǔn)濾光片(如鈥玻璃濾光片),其標(biāo)稱值與實測值偏差應(yīng)<±0.5nm。
自動校正:運行波長校準(zhǔn)程序,儀器自動掃描并定位濾光片的特征吸收峰,修正單色器波長刻度。
注意:若多次校準(zhǔn)仍超差,需清潔單色器內(nèi)部鏡面或調(diào)整狹縫寬度。
方法二:鐠釹濾光片雙峰校驗
高精度驗證:使用含Pr-Nd元素的復(fù)合濾光片,其在特定波長處有兩個尖銳吸收峰,可同步檢驗波長重復(fù)性和分辨率。
三、吸光度校準(zhǔn)
零點校正(暗電流扣除)
空白對照:樣品倉放入匹配的參比池(盛裝溶劑或空白溶液),關(guān)閉樣品室蓋,執(zhí)行“校零”操作,消除暗電流及雜散光干擾。
能量平衡:調(diào)整光電倍增管電壓,使參比狀態(tài)下透光率為100%T(對應(yīng)吸光度A=0)。
標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定
配制標(biāo)準(zhǔn)品:選用硝酸鉀溶液(KNO?)或重鉻酸鉀溶液(K?Cr?O?),按藥典要求精確配制。
多點校準(zhǔn):在不同波長下測量標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算回歸系數(shù)R²應(yīng)>0.999。若偏離,需檢查比色皿配對性及溶液純度。
四、基線平直度測試
全波段掃描:以空氣或空白溶劑為參比,在200-800nm范圍內(nèi)進行全波長掃描,觀察基線漂移量。
合格標(biāo)準(zhǔn):基線波動幅度應(yīng)<±0.002Abs,否則需清洗比色皿、更換干燥劑或檢修檢測器。
五、樣品測試驗證
實際樣品測試:選取已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液(如硫酸銅溶液),在最大吸收波長處連續(xù)測量5次,計算RSD值應(yīng)<0.5%。
重復(fù)性檢驗:同一溶液反復(fù)進樣測量,吸光度極差應(yīng)<0.003Abs,反映儀器穩(wěn)定性。
通過上述系統(tǒng)化調(diào)試,可確保紫外可見分光光度計的波長準(zhǔn)確度、吸光度線性及基線穩(wěn)定性滿足GB/T 17681-202X標(biāo)準(zhǔn)要求。日常使用中需注意避免強光直射樣品室,定期進行性能驗證,以保證檢測結(jié)果的可靠性。